活动详情
活动项目:蛋白质分子量测定、 基于SDS-PAGE的蛋白分离、蛋白胶点/胶条/IP样品蛋白质鉴定、Pull-down靶蛋白质谱鉴定、多肽鉴定、非变性质谱分析(Native MS)
活动日期:2020年4月23日-2020年4月28日
优惠详情:下单立享8.8折优惠
注:本活动不与其他优惠共享
鉴定流程
样品前处理:蛋白还原烷基化后使用高度特异性的蛋白酶进行蛋白样品消化,获得多肽片段
上级分析:通过纳升级色谱(nano-flow)结合高分辨率质谱,在最高的灵敏度下对肽段进行分离并使用超高分辨率质谱仪采集肽段质谱数据
数据库检索:结合样品物种对应的蛋白质数据库对成千上万张质谱图进行分析(使用Uniprot数据库,每月更新一次数据库,以确保访问最新数据),从而实现样品中蛋白的鉴定
出具报告:鉴定报告中会包括详细的样品前处理步骤,色谱-质谱平台参数,以及鉴定得到的蛋白质列表和肽段列表。质谱原始数据会通过网盘形式提供
样品制备
1D SDS PAGE /2D PAGE gels样品
1. Coomassie Blue, SYPRO Ruby 以及Silver stain样品均可进行蛋白的鉴定试验;
2. 银染的样品有可能与后续的质谱分析不兼容,我们推荐您使用下面的产品或者实验步骤进行银染实验:
ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2)
Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480)
3.银染的样品请不要进行脱色处理。
液体样品(In solution format)
1. 如果您洗脱的样品需要跑胶,请按照1D SDS PAGE样品准备要求准备样品即可;
2. 假如样品中蛋白量>10ug,我们对样品的缓冲体系没有要求;
3. 假如样品中蛋白量<10ug,样品准备过程中尽量减少SDS等表面活性剂的使用,并注意降低盐浓度;
4. 提交样品过程中,请同时提供样品的缓冲体系和样品中蛋白的预估含量。
注意事项
1.如果需要切胶,一定佩戴手套;
2.切胶的刀片保持干净;
3.切胶的条带尽量精确,条带以外额外的胶条可能会产生背景;
4.尽量避免角蛋白污染,角蛋白一般来源于样品准备,跑胶,切胶过程中,甚至实验室的空气中,尽量保持在干净的环境中进行试验操作。
联系信息
咨询电话:010-57231915;152-0137-7680
公司邮箱:info@biotech-pack.com
公司地址:北京市朝阳区北新桥三条
官方网站:http://biotech-pack.com