随着蛋白药物的迅速发展,单抗药物迅速发展,作为大分子糖蛋白药物,单抗药物的糖基化修饰对其稳定性、有效性和安全性等各方面均有不同程度的影响,因此对其糖基化修饰进行全面表征具有十分重要的意义。
本月百泰派克生物推出了糖蛋白相关的分析服务活动,详细活动信息如下;
服务项目:蛋白质糖型分析、蛋白质糖基化位点分析、糖基化位点及该位点糖型分析
活动时间:2019.05.01-2019.05.15
活动详情
活动期间凡是订购以上服务项目:
1. 单笔订单满30000元,即可赠送价值100元京东购物券
2. 单笔订单满50000元,即可赠送数据分析服务
活动规则
1.本项优惠活动不可与其他活动同享;
2.本活动最终解释权归北京百泰派克生物科技有限公司所有。
更多促销详情,敬请咨询:010-57231915
研究流程
一. 蛋白质糖型分析
1.利用PNGase F酶解释放目标蛋白中的N-糖链;
2.以2-AA对N-糖链进行标记,SPE柱特异性富集N-糖链;
3.根据目标蛋白糖基化的复杂程度,选用MALDI-TOF-TOF或 LC-MS/MS检测2-AA标记的N-糖链;
4.使用GlycoWorkbench软件(CFG数据库)确定N-糖链;
5.并根据相应糖基的质谱峰面积分析该种糖型的相对含量。
二. 蛋白质糖基化位点分析
1.用多种酶对蛋白质进行酶解;
2.于重标H218O中,采用PNGase F或多种的O-糖基酶,将目标蛋白中的糖基酶解下来,此时发生糖基化修饰的肽段将会带上一个18O;
3.通过数据库检索,确定发生糖基化修饰的位点。
三. 糖基化位点及该位点糖型分析
1.用多种酶对目标蛋白质进行酶解,尽可能完全的覆盖目标蛋白序列;
2.将糖基酶切下来后,对该蛋白中的糖基化位点进行分析;
3.确定发生糖基化修饰的肽段后,重新对目标蛋白进行酶解,并且保留肽段上的糖基;
4.采用LC-MS/MS分析时,利用ETD\HCD\CID联合碎裂的方式,获得尽可能丰富的肽段二级碎裂信息;
5.通过对糖基化修饰肽段二级图谱的软件分析以及人工鉴定,获得目标蛋白中糖基化位点及该位点糖型的准确信息。